本文標題："測量酶活性可用中止反應試驗-生物實驗"

發布者：yiyi ------ 分類: 行業動態 ------ 人瀏覽過-----時間：2016-8-30 1:1:19

測量酶活性可用中止反應試驗-生物實驗

中止反應法測定酶活性

測量酶活性可用中止反應法(Stoppedmethod)或連續反應法中

止反應法是將酶反應按時即刻完全停止，取出反應物或產物，于以

分離，再確定產物的生成量或反應物的消耗量，算出酶活性。連續

反應法無需取樣中止反應，而是在酶反應過程中，用儀器來監測反

應進行的情形，記錄結果，算出酶活性。連續法用一個樣品可以作

多次測定，使用方便，又極易查出動力學的反應級數。若是零級反

應，產物的量當與酶活性成正比，可以立刻算出結果，但是很多酶

反應卻無法使用連續法，而中止反應法雖略感不便，幾乎任何酶都

可以用這種方法測量酶活性。

中止反應法中止反應法是在酶和底物的恒溫反應過程中，在

到達各個予定的時間時，取出定量的樣品，使酶立刻變性，不再反

應，然后測量反應產物的生成量。由零時開始，產物的生成量至少

在開始階段的一兩分鐘內應形成直線形的增加，否則一定是測量錯

誤，或反應條件不對，才會發生偏差。欲使酶變性，最常用的方法

是加入三氯乙酸或過氯酸使酶蛋白沉淀。

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