本文標(biāo)題："細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體實(shí)驗(yàn)用熒光分析圖像顯微鏡"
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細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體實(shí)驗(yàn)用熒光分析圖像顯微鏡
通過細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)體報告的基于Pyranine的pH測定法，其中存在的一個問題是染
料pH敏感性的鈍化。特別是在最初的時間點(diǎn)或采用高度穩(wěn)定的脂質(zhì)體時
如已知脂質(zhì)體是處于中性pH，這種作用卻在
光譜上顯示為明顯的脂質(zhì)體囊內(nèi)酸化。這種假象的部分原因在于Pyranine與脂質(zhì)體
膜界面區(qū)的相互作用，也有部分原因是由于高濃度時染料一染料的相互作用。
雖然Pyranine法簡單并且能準(zhǔn)確測定細(xì)胞內(nèi)pH，但如孵育時間較長(脂質(zhì)體開始滲漏)
或使用較不穩(wěn)定的脂質(zhì)體時.最好采取另一方法.這種方法與Pyranine法一樣，都
是基于熒光比值，但采用了雙熒光團(tuán)，并通過親水性的間隔臂共價結(jié)合，使熒光團(tuán)定
位于脂質(zhì)體外部
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